Препарат вводят только в/м глубоко. Дозировка зависит от вида тяжести инфекции. Приведенные ниже дозы носят только справочный характер. Взрослым назначают по (0,6-)1–1,5(−4) млн МЕ в день в 1–2 приема; детям — по 30 000–100 000 МЕ/кг в день в 1–2 приема. Продолжительность лечения зависит от показаний и клинической картины. При отдельных заболеваниях рекомендуются следующие курсы: врожденный сифилис — 50 000 МЕ/кг в день в течение 2 нед; начальный сифилис у взрослых (менее 1 года продолжительностью) — 1,2 млн МЕ однократно 1 раз в день в течение 10 последующих дней; острая неосложненная гонорея — 4,8 млн МЕ однократно в комбинации с пероральным приемом 1 г пробенецида; сибирская язва (кожная форма) — 0,6–1,2 млн МЕ в день.